Evaluation of chemokines and receptors in gnotobiotic root canal infection by F. nucleatum and E. faecalis

Abstract The present study aims to evaluate the longitudinal effects of induced experimental infections in gnotoxenic animals on the expression of inflammatory chemokines and their receptors in periradicular tissues. The null hypothesis tested was that Enterococcus faecalis and Fusobacterium nucleatum had no effect on CCR5, CCL5, CXCL10, CCL2/MCP-1, CXCR2 and CCR1 expression. Two groups of five animals (n = 5) aged between 8 and 12 weeks were used in this study. The animals were anaesthetized, and coronary access was performed in the first molar on the right and left sides. Microorganisms were inoculated into the left molar, and the right molar was sealed without contamination to function as a control. Animals were sacrificed 7 and 14 days after infection, and periapical tissues were collected. The cytokine mRNA expression levels were assessed using real-time PCR. The chemokine mRNA expression levels demonstrated that the experimental infection was capable of inducing increased chemokine expression on day 7 compared to that on day 14, except for CCR5 and CCL5, which showed no changes. The gnotoxenic animal model proved to be effective and allowed evaluation of the immune response against a known infection. Additionally, this study demonstrates that gene expression of chemokines and their receptors against the experimental infection preferentially prevailed during the initial phase of induction of the periradicular alteration (i.e., on day 7 post-infection).

Evaluación del poder antiséptico del cemento de Grossman combinado con yodoformo sobre distintas cepas bacterianas encontradas en infecciones de origen endodóntico / An evaluation of the antiseptic efficacy of Grossman´s cement combined with iodoformium on different bacterial strains found in infections of endodontic origin

La obturación de los conductos radiculares consiste en el relleno permanente del “espacio endodóntico” y el reemplazo del contenido normalo patológico del conducto por materiales que deben estar bien compactados y adaptados a las paredes del mismo. Al ser imposible la desinfección total de los conductos radiculares, es evidente la necesidad de utilizar un sellador endodóntico con acción bactericida, o al menos bacteriostática, que pueda actuar contra las bacterias que persisten luego de la preparación quirúrgica del conducto radicular. El objetivo de este estudio fue evaluar in vitro el poder antiséptico del cemento de Grossman, un material de obturación muy utilizado en endodoncia, en combinación con 2 proporciones de yodoformo, sobre bacterias comúnmente encontradas en infecciones de origen endodóntico. Resultados: el yodoformo puro no evidenció capacidad antiséptica sobre ninguna de las cepas estudiadas. Sin embargo, al asociarse con CG incrementó su efecto inhibitorio sobre Streptococcus mutans y sobre Enterococcus faecalis, en forma concentración-dependiante.

The sealing of the root canal consists in permanent "endodontic space" filling and the replacement of the normal or pathological conduit content by materials that should be well compacted and adapted to the walls thereof. Due the impossibility of total disinfection of the root canal, it is clear the need for a root canal sealer with bactericide or bacteriostatic effect that can act against bacteria that persist after surgical preparation of the root canal. The aim of this study was to evaluate in vitro the antiseptic power of Grossman cement, (GC) a material widely used in endodontic obturation, in combination with two proportions of iodoform, on bacteria commonly found in infections of endodontic origin. Results: the pure iodoform showed no antiseptic capacity on any of the strains studied. However, in association with GC, it increased its inhibitory effect on Streptococcus mutans and Enterococcus faecalis in concentration dependent-way.

Análise epidemiológica, microbiológica e resposta imune periapical em pacientes HIV positivos e negativos portadores de infecções endodônticas / Epidemiologival, microbiological and immunological analysis of endodontic infections in HIV positive and HIV negative patients

As patologias pulpo-periapicais abrangem muitas áreas do conhecimento, tais como a epidemiologia, microbiologia e imunologia. Muito estudadas em humanos e animais, pouco foi pesquisado sobre a interferência da síndrome da imunodeficiência adquirida humana sobre essas alterações. Este estudo analisou a necessidade de tratamento endodôntico em uma população HIV-positiva, e correlacionou esse achado com os dados pessoais e sistêmicos desses indivíduos. Aqueles que apresentavam necessidade de tratamento endodôntico tiveram seus canais radiculares analisados quanto ao perfil microbiológico e imunológico. Pacientes HIV negativos foram também avaliados para que se confrontassem os dados...

Prevalence of Candida species in necrotic pulp with chronic periapical processes

El propósito de este estudio fue identificar especies del géneroCandida en mucosa de cavidad bucal y dientes unirradiculares con necrosis pulpar con procesos periapicales crónicos de origen endodóntico con imágenes radiográficas entre 2±4 mm sin sintomatología clínica en pacientes inmunocompetentes. El estudio incluyó 82 pacientes inmunocompetentes de ambos sexos con edades entre 18-70 años con diagnóstico clínico dentario de necrosis pulpar séptica. Las muestras fueron obtenidas del conducto radicular con conos de papel estéril # 25 y de lamucosa bucal mediante hisopo estéril. Se identificaron 7 especies diferentes de Candida (C. albicans, C. dubliniensis,C. guilliermondii, C. krusei, C. arapsilopsis, C. tropicalis y C. glabrata). Todas estuvieron presentes en mucosa bucal, mientras que dos de ellas (C. parapsilopsis y C. glabrata) nose identificaron en zona periapical de conductos con necrosis Del total de las muestras aisladas de mucosa bucal hubo una frecuencia significativamente mayor de C. albicans que la proporción de estas levaduras en la zona periapical en conductos con necrosis.

Primeiro relato de isolamento e identificação taxonômica de fungos filamentosos em infecções endodônticas / First report of isolation and taxonomic identification of filament fungus in endodontic infections

A proposta deste trabalho foi demonstrar in vivo, por meio de técnicas específicas de isolamento, a presença de fungos filamentosos nos canais radiculares de dentes portadores de necrose pulpar e lesão periapical, relacionar sua presença a pacientes com resposta imunológica comprometida e realizar o estudo taxonômico dos isolados. Foram realizadas culturas de 60 canais radiculares com polpa necrosada e lesão periapical. Os pacientes responderam a um questionário de saúde e assinaram permissão para realização da pesquisa. Após isolamento absoluto e assepsia do campo operatório, as amostras foram coletadas utilizando-se 3 pontas de papel absorvente estéreis inseridas no canal radicular uma a uma, durante 1 minuto. Em campo isolado por duas lamparinas, o material coletado foi inoculado em um tubo de ensaio contendo meio de Saboraud Agar acrescido de Cloranfenicol. Próximo ao campo isolado pelas duas lamparinas, foi colocada uma placa de Petri aberta contendo o mesmo meio de cultura contido no tubo de ensaio, com o intuito de verificar a acuidade do isolamento do campo (controle negativo). Ao mesmo tempo foi efetuado um controle positivo, através de uma placa de Petri que permaneceu aberta durante a coleta, fora do campo isolado. Os tubos e placas de Petri foram mantidos em temperatura ambiente por um período de sete a quatorze dias observando o crescimento micelial. Aqueles que apresentaram crescimento foram semeados em meios específicos para microcultivo CYA Agar, Extrato de Malte Agar, ou Agar Batata. Com o auxílio de microscopia óptica, as colônias foram identificadas em gênero e espécie. Das 60 amostras coletadas, 17 apresentaram cultura positiva para fungos filamentosos, perfazendo um total de 28,3 %...

The purpose of the present study was to evaluate in vivo, with specific techniques that isolates the presence of filament fungus in the root canal of teeth with necrotic pulp and perirradicular disease, see the relationship between the presence of these fungus and patients with immunological deficiency and carry out a taxonomic study of the fungus isolated. It was fulfilled the culture of 60 root canals of teeth with necrotic pulp and perirradicular disease. The patients answered a health questionnaire and signed a term to allow the research. After the absolute isolation and cleaning the operating field the samples were collected using three sterile paper points inserted into the root canal during 1 minute. In an isolated field by two lamps, the collected materials were inoculated in a tube with Saboraud Agar with Cloranfenicol. Nearby the isolated field with lamps it was placed an opened Petri plaque with the same culture material from the tubes with the purpose to verify the perceptiveness of the isolated field (negative control). At the same time it was carried out the positive control group with an opened Petri plaque that was maintained far from the isolated fields. The tubes and the Petri plaque were maintained in atmosphere temperature during seven to fourteen days to observe micelial growth. Those that showed growth were spread on specific environment for microcultivation CYA Agar, Extract of Agar Malt or Agar potato. With the help of an optic microscope the colonies were identified in genre and species. Among the 60 samples collected, 17 showed positive culture for filament fungus, making up a total of 28,3%...

Periradicular repair after two-visit endodontic treatment using two different intracanal medications compared to single-visit endodontic treatment

The number of appointments necessary to treat infected root canals is one of the most controversial issues in endodontics. This study evaluated, in dogs, the response of the periradicular tissues to the endodontic treatment of infected root canals performed in a single visit or in two visits, using different interappointment dressings. Periradicular lesions were induced by inoculating Enterococcus faecalis in the root canals. After confirming that a periradicular lesion developed, the root canals were treated within one or two visits, using either ozonized oil or calcium hydroxide in camphorated paramonochlorophenol (CMCP) as an intracanal medication. After 6 months, the animals were sacrificed and the specimens were processed for histological and histobacteriological analysis. The root canals treated in a single visit showed a success rate of 46 percent. When a calcium hydroxide/CMCP-based interappointment intracanal medication was used, 74 percent of the cases were categorized as success. In cases where ozonized oil was used as the intracanal medication, a success rate of 77 percent was observed. These results of the present study demonstrated that the two-visit treatment offered a higher success rate compared to one-visit therapy. In addition, ozonized oil may potentially be used as an intracanal medication.

O número de sessões necessárias para tratar um canal radicular infectado é um dos assuntos mais controversos da endodontia. O objetivo deste estudo foi analisar, em cães, a resposta dos tecidos perirradiculares ao tratamento endodôntico de canais infectados em uma ou duas consultas, usando diferentes medicamentos entre as sessões. Lesões perirradiculares foram induzidas pela inoculação de Enterococcus faecalis nos canais. Após a confirmação do desenvolvimento de uma lesão perirradicular, os canais foram tratados em uma ou duas sessões, usando óleo ozonizado ou hidróxido de cálcio associado ao paramonoclorofenol canforado (PMCC) como medicação intracanal. Após 6 meses, os animais foram sacrificados e os espécimes processados para análise histológica e histobacteriológica. Os canais tratados em sessão única apresentaram uma taxa de sucesso de 46 por cento dos casos. Quando a medicação usada entre as sessões foi o hidróxido de cálcio associado com o PMCC, 74 por cento dos casos resultaram em sucesso. Nos casos em que o óleo ozonizado foi usado, uma taxa de sucesso de 77 por cento foi observada. Esses achados demonstraram que o tratamento em duas sessões oferece uma taxa de sucesso mais alta quando comparado à terapia em uma sessão. Além disso, o óleo ozonizado mostrou potencial para ser usado como medicação intracanal.

Influence of sodium hypochlorite-based irrigants on the susceptibility of intracanal microbiota to biomechanical preparation

This study evaluated the microbiological conditions of root canals, using smears and culture from anterior teeth and premolars with necrotic pulps associated with chronic periapical pathologies, before and after biomechanical preparation (BMP). During double-flared instrumentation, 1, 2.5 and 5 percent sodium hypochlorite (NaOCl)-based irrigants were used in 3 groups: GI (n=39), GII (n=36) and GIII (n=36), respectively. Before BMP, all cultures were positive and the smears showed microbiologically diverse morphotypes, including fusiforms, pleomorphic, rods, cocci and filaments. Quantitetively, 20, 20 and 23 morphotypes were identified in GI, GII and GIII, respectively). After BMP, the percentages of negative cultures in GI, GII and GIII were 74.2 percent, 86.3 percent and 93.4 percent (p>0.05) and the number of morphotypes decreased to 14, 15 and 5, respectively. All teeth with 2 root canals and/or associated fistulas were microbiologically negative after BMP, regardless of irrigant concentration. Gram-negative morphotypes were more susceptible to the action of irrigants. After irrigation with 5 percent NaOCl, only structural arrangements consisting of Gram-positive cocci and bacilli persisted. Thus, BMP plus 5 percent NaOCl offered the best antiseptic potential because in the few positive cultures a significant reduction in the number of microbiological morphotypes was also shown (p<0.05).

Este estudo avaliou as condições microbiológicas dos canais radiculares, por meio de esfregaços e culturas de dentes anteriores e pré-molares com necrose pulpar associada à radiolucidezes periapicais, antes e após o preparo biomecânico (PBM). Utilizou-se a técnica de instrumentação biescalonada coadjuvada por soluções de hipoclorito de sódio (NaOCl) a 1, 2,5 ou 5 por cento nos grupos I (n=39), II (n=36) e III (n=36), respectivamente. Antes do PBM havia 100 por cento de culturas positivas e os esfregaços proveram diversificados morfotipos microbiológicos, sendo 20, 20 e 23 nos grupos I, II e III, respectivamente. Após o PBM, o percentual de culturas negativas nos grupos I, II e III foi 74,2 por cento, 86,3 e 93,4 por cento (p>0,05) e a incidência de morfotipos declinou para 14, 15 e 5, respectivamente. Todos os dentes birradiculados e/ou portadores de fístulas apresentaram-se microbiologicamente negativos após o PBM, independentemente do irrigante utilizado. Os morfotipos Gram-negativos foram mais suscetíveis à ação do PBM. Após o PBM persistiram apenas cocos e bacilos Gram-positivos no grupo III. Portanto, o PBM coadjuvado por solução de NaOCl a 5 por cento, proporcionou o melhor desempenho anti-séptico, pois, nas poucas culturas positivas, houve também significativa redução do número de morfotipos microbiológicos (p<0.05).

Er: Yag laser irradiation of the microbiological apical biofilm

One problem in cases of healing-resistant periapical lesions is to eradicate the contamination at the periapical area. This contamination is due to the microbiological biofilm formed by microorganisms and their subproducts lodged in apical third of the root, on both cementum and dentin surface. Paraendodontic surgery consists of the mechanical removal of harmful agents to promote healing and periapical health. The purpose of this study was to assess the results of Er:YAG laser irradiation on the apical root third of newly extracted teeth to eliminate microbial contamination on root apex surface. Apical irradiation was performed with an Er:YAG laser device using an experimental contact tip, at 100 mJ, 10 Hz, 1 W, 39 J/cm², 3 times on the target area. SEM analysis showed the elimination of part of the irradiated cementum and the formation of small roughened without exposing the subjacent dentin. Vaporization of the remaining periodontal tissue and removal of microbiological apical biofilm (MAB) were also observed on the irradiated areas. Under the tested conditions and based on the findings of this study, Er:YAG laser may be considered effective for removal of microbiological apical biofilm.

A problemática dos casos envolvendo pacientes portadores de lesões periapicais resistentes é a eliminação da infecção que atinge a região periapical. Esta infecção é composta por microrganismos e seus subprodutos alojados no cemento e dentina do terço apical, sob forma de biofilme microbiano. A execução da cirurgia paraendodôntica com vistas à promoção da saúde do periápice, invariavelmente resume-se em remover mecanicamente os agentes causadores da doença, com objetivo de proporcionar a reparação. O propósito deste estudo foi avaliar o resultado da irradiação com laser de Er:YAG no terço apical de dentes recém extraídos com relação à infecção microbiana na superfície do ápice radicular. O laser Er:YAG foi empregado para irradiação de ápices radiculares, com ponteira experimental de contato (Chisel, Morita co.), utilizando energia de potência de 100 mJ, 10 Hz, por 3 vezes em área delimitada no terço apical das raízes. Os resultados do estudo em microscopia eletrônica de varredura mostraram a eliminação do tecido periodontal remanescente juntamente com quantidade significativa de microrganismos. Portanto, pode-se concluir que o laser de Er:YAG nas condições experimentais testadas mostrou-se efetivo na remoção de microrganismos do tecido periodontal contaminado e do cemento sem expor a dentina subjacente.

Bacterial profile in primary teeth with necrotic pulp and periapical lesions

O objetivo desse estudo foi avaliar, por meio de cultura bacteriológica, a prevalência de microrganismos em canais radiculares de dentes decíduos de humanos com necrose pulpar e lesão periapical. Foram selecionados 20 dentes decíduos humanos com necrose pulpar e lesão periapical. Após a realização da abertura coronária foi efetuada a colheita para exame bacteriológico do conteúdo do canal radicular, introduzindo-se seqüencialmente 4 cones de papel absorvente esterilizados, providos de aleta metálica, de número compatível com o diâmetro do canal radicular. Após 30 s, os cones foram removidos e transferidos para um tubo de ensaio contendo fluido para transporte reduzido (RTF) e enviados para processamento microbiológico. Os microrganismos anaeróbios foram quantificados em 100% dos casos, os bacilos pigmentados de negro em 30%, os aeróbios em 60%, os estreptococos em 85%, os bacilos gram-negativos aeróbios em 15% dos casos e os estafilococos não foram quantificados. Os estreptococos do grupo mutans foram quantificados em 6 canais radiculares (30%), sendo que em 5 canais estavam presentes Streptococcus mutans e em 1 canal Streptococcus mutans e Streptococcus sobrinus. Concluiu-se que nos canais radiculares de dentes decíduos de humanos portadores de necrose pulpar e lesão periapical há uma infecção polimicrobiana com predomínio de microrganismos anaeróbios.

Efecto del piroxicam sobre la microflora local en el complejo pulpoperiapical posterior a la exposición pulpar / Effect of piroxicam on local microflora on the pulp-periapical complex, after pulp exposure

El objetivo de este reporte fue determinar el efecto del piroxicam (antiinflamatorio no esteroide) sobre las bacterias en el complejo pulpoperiapical, cuando se administra para inhibir el desarrollo de lesiones periapicales experimentales. A 12 ratas cepa long Evans se les provocó exposición pulpar previo a la administración de piroxicam, administrando el medicamento cada 24 horas durante 15 días. Se encontró que el porcentaje de bacterias decrece de la cámara pulpar hacia el periápice observándolos escasos en la lesión periapical en ambos grupos, sin embargo se encuentran incrementados con respecto a porcentajes en el grupo al cual se le administró el piroxicam, lo que sugiere que si bien el piroxicam disminuye el desarrollo de lesiones periapicales, favorece el desarrollo de bacterias incrementando su número en el complejo pulpoperiapical

Detecçäo de anticorpos IgG para Porphyromonas gingivalis (Bacteroides gingivalis) e Prevotella intermedia (Bacteroides intermedius) em lesöes periapicais crônicas pela técnica de imunofluorescência indireta / Detection of IgG antibodies to Porphyromonas gingivalis (Bacteroides gingivalis) and Prevotella intermedia (Bacteroides intermedius) in chronic periapical lesions by immunofluorescence

Lesöes periapicais crônicas foram avaliadas pela técnica de imunofluorescência indireta com o propósito de estimar a presença de anticorpos IgG específicos para o Bacteroides gingivalis e Bacteroides intermedius. Das 15 amostras examinadas, 7 (46,6 por cento) apresentaram reatividade anticórpica